GRAM-Färbung nach Hans Christian Gram

Die Standardmethode der GRAM-Färbung wurde ursprünglich 1884 von Christian Gram entwickelt und dient der Differenzierung von intakten, morphologisch ähnlichen Bakterien in zwei Gruppen. Die Unterscheidung dieser Gruppen basiert auf der unterschiedlichen Anfärbung der Zellen nach Anwendung der Färbemethode. Ergänzend werden Zellform, Größe und strukturelle Details erkennbar. Diese Informationen können erste Anhaltspunkte für die Identifizierung des Organismus/der Organismen geben. 

Prinzip der GRAM-Färbung

Durch Einsatz der Färbelösungen bildet sich bei der GRAM-Färbung im Protoplasma der gefärbten Mikroorganismen ein Kristallviolett-Jod-Komplex. Nach der Entfärbung und Gegenfärbung werden diejenigen Bakterien, die in der Lage sind, diesen Farbstoffkomplex zurückzuhalten, als grampositiv eingestuft, während die Bakterien, die entfärbt werden und den Gegenfarbstoff aufnehmen, als gramnegativ eingestuft werden. Bei Beschädigung oder Entfernung der Zellwand kann das Protoplasma sowohl grampositiver als auch gramnegativer Zellen entfärbt werden, so dass Zellen falsch als gramnegativ eingestuft werden. Daher basiert der Mechanismus der Gram-Färbung auf dem Vorhandensein einer intakten Zellwand, die die Entfärbung der Primärfärbung verhindert. Im Allgemeinen sind Zellwände nicht-selektiv durchlässig. Während des Gram-Färbeverfahrens wird die Zellwand grampositiver Zellen durch den Alkohol im Entfärber dehydriert und verliert an Permeabilität, so dass die Primärfärbung erhalten bleibt. Die Zellwand der gramnegativen Zellen weist einen höheren Lipidgehalt auf und wird bei der Behandlung mit Alkohol durchlässiger, wodurch die Primärfärbung verloren geht und die spätere Gegenfärbung ermöglicht wird.

GRAM-Färbung: Das Dagatron Färbeset

Für die GRAM-Färbung mit dem Dagatron Färbeset werden die Färbelösungen Crystal Violet, GRAM Iodine, Aceton Alkohol und Safranine benötigt. Alternativ kann Safranine durch die BIOMED Färbelösung Fuchsin ersetzt werden. 

Geeignet sind die Färbelösungen für die Dagatron Färbeautomaten AT-2000G GRAM Auto Stainer, AT-3003 GRAM/AFB Dual Stainer und AT-2000I INDIVIDUAL.